实验介绍：通过在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化实时监测PCR 扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,对起始模板进行定量分析的方法，可对初始模版进行绝对定量和相对定量。常用的实验方法有SYBR Green I 法和Taq Man探针法。荧光定量PCR 可用于m RNA 表达量水平检测、Micro RNA 表达量水平检测、RNA i效率检测和基因拷贝数检测。

实验流程：

1. 样品要求：

1) 如果实验材料为动物组织样品，质量应大于1 g；

2) 如果实验材料为植物样品，样品质量大于2 g；

3) 如果实验材料为培养细胞，细胞数目应大于1×106~7个；

4) 如果实验样品为血液样品，体积不少于1.5 mL。

2. 样品纯度要求：

1)如果实验材料是OD 260/280在1.8-2.0之间，RNA无降解、28S和18S核糖体RNA条带清晰明亮，28S的密度大约是18S的2倍。或者Agilent 2100检测仪分析RNA的完整性数据RIN ≥ 8；

2)无蛋白质、基因组中DNA污染，如有污染请除去蛋白并进行DNase I处理。

返回给客户的实验结果与实验材料：

1.荧光定量PCR实验报告（RNA浓度及荧光定量PCR原始数据及分析结果）

2.详细的实验步骤

实验注意事项和说明：

1.由于荧光定量PCR可以检测任何类型样本中基因的表达量，如组织、细胞、细菌等材料。因此本公司接受任何类型的样本，对于不同的样本需要的量有所不同，具体需要量请咨询本公司

2.不推荐提供RNA或cDNA样品，除非您能充分证明所提供RNA/cDNA是高质量的且可用于荧光定量PCR

3.客户提供尽可能详细的背景信息；物种信息，扩增目的基因的NCBI登录号

4.客户可以提供荧光定量PCR引物，如果没有引物，本公司可以设计合成,但要另外收取费用。

注：样本应避免各类污染和反复冻融。