实验介绍:碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性,质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离。当用酸性的NaAc/KAc高盐缓冲液去调节其pH值至中性时,变性的质粒DNA又恢复原来的构型,而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构。通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
实验流程:
客户需提供的实验材料:
1.质粒或含质粒的甘油菌一份
2.需提供质粒图谱,及相关引物序列或测序序列,以便小提检测
3.需说明是否去除内毒素
4.需提前告知需要的质粒总量
返回给客户的实验结果与实验材料:
1.符合需求的质粒
2.小提质粒的检测结果
3.详细的实验步骤